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| 项目编号 | BA* | 项目名称 | 人参益元颗粒对化疗后免疫功能低下大鼠及Lewis荷瘤小鼠瘤体生长和免疫功能的影响（测试加工服务） |
|---|---|---|---|
| 经办人单位 | (略) （白求恩第 (略) ） | 经办人 | 吴荻 |
| 预算金额 | *.00 人民币 | 成交金额 | *.00 人民币 |
| 成交供应商 | 吉林省 (略) | 质保期 | 24 月 |
| 联系地址 | 吉林省- (略) -经济技术开发 (略) 6426号 | 采购单位 | 吉林 (略) （白求恩第 (略) ） |
| 付款方式 | 服务完毕验收合格后100%付款。 | ||
| 供应商联系手机 | * | 服务时间 | 2024年04月01日 至 2024年06月01日 |
| 服务地址 | 吉林省- (略) -经济技术开发 (略) 6426号 | ||
| 验收方式 | 以成交单为准，参考相关内容进行验收。验收程序以*方职能部门规定为准。 | ||
| 售后服务要求 | 1.在提供实验室服务后，吉林省 (略) 应根据我方要求，真实、及时的进行试验并出具试验报告，应确保实验结果的准确性和可靠性。 2.根据现行有效标准、规程、规范及进度进行检测。并对检测数据及检测报告负责，如果我方对实验结果存在异议，及时向吉林省 (略) 提出，吉林省 (略) 应积极处理并提供解决方案。 3.吉林省 (略) 应保持对我方提供的实验方案和相关信息的保密，不得向任何第三方披露或泄露。除非获得我方书面同意或法律法规另有规定。 | ||
| 采购材料 | 评审报告.jpg | ||
| 采购品目 | 其他研究和试验开发服务 | 名称 | 测试加工费 |
|---|---|---|---|
| 单位 | 项 | 数量 | 1 |
| 单价 | ￥* | 总价 | ￥* |
| 范围/服务内容及要求 | 实验一 （一）研究内容 观察人参益元颗粒对Lewis荷瘤小鼠瘤体生长和免疫功能的影响。 成人每日14g（小鼠：12.33*14g/60kg=2.88g/kg） （二）研究方法 1. 实验材料 1.1实验细胞 实验细胞采用小鼠Lewis肺癌细胞细胞株。细胞株使用含10%胎牛血清和1%青链霉素的高糖 DMEM培养基，在5%CO2、37℃条件下培养，稳定传代至4-5代备用。 1.2实验动物 实验动物购自于北京维通利华 (略) ，采用8周龄C57BL/6J雌性小鼠，55只，体重18-20g。 2实验方法 2.1皮下接种 用PBS将Lewis细胞制备成细胞悬液，根据预实验调整细胞悬液浓度至指定浓度（在5×106 /mL上下选择，需要根据预实验结果判定该批细胞株增殖活性）。 在超净台上操作，用75%酒精消毒C57BL/6小鼠右腋窝部皮肤，准备细胞接种注射前使用移液枪将预先配制好的细胞悬液充分吹散，用注射器吸取Lewis肺癌细胞细胞悬液0.2mL，针头轻轻刺入皮下，推入肿瘤细胞悬液。 2.2人参益元药液配制 本研究使用的人参益元颗粒由吉林省 (略) 制剂室提供，药物组成：黄人参、黄芪、佛手、白芍、鸡血藤、甘草，规格：每袋装10g，一次1袋，一日1次。称量2.88g，蒸馏水定容至10mL。 2.3动物分组及干预 随机选取10只小鼠作为空白对照组，其余小鼠接种Lewis细胞，接种后1周，检查小鼠成瘤情况，用手指轻轻触摸小鼠右侧腋下皮肤，若接种成功则可触及约黄豆粒大小的结节。选取造模成功的荷瘤小鼠40只，按体质量随机分为4组(每组10只)：中药组、顺铂组、中药联合顺铂组(中西药组)和模型组。从接种后第8天开始，给予荷瘤小鼠相应药物干预： ①对照组：按10mL/kg每日灌服蒸馏水，连续灌胃21天，并从第1天开始隔天腹腔注射生理盐水0.4ml； ②模型组：按10mL/kg每日灌服蒸馏水，连续灌胃21天，并从第1天开始隔天腹腔注射生理盐水0.4ml； ③顺铂组：从第1天开始，隔天腹腔注射顺铂注射液0.4ml(浓度2mg/kg)，共注射10次，同时按10mL/kg每日灌服蒸馏水21天； ④中药组：从第1天开始每日灌胃人参益元颗粒10mL/kg，连续灌胃21天，并隔天腹腔注射生理盐水0.4ml，共注射10次； ⑤中西药组：按照人参益元颗粒10mL/kg每日连续灌胃21天，同时隔天腹腔注射顺铂注射液0.4ml,共10次。 3.观测指标 3.1一般观察和体重 每天检查小鼠的体重和一般情况，包括行为、皮毛状态、食物摄入量和排便情况。 3.2瘤体体积测量 分别于干预周期的第1、4、7、10、14、20天，用电子游标卡尺测量各组小鼠皮下肿瘤的长径和短径，根据长径(a)和短径(b)来计算肿瘤体积，计算公式为：V(cm3)=ab2/2,以干预天数为横轴，小鼠肿瘤体积为纵轴，绘制各组小鼠的肿瘤生长曲线。（每组10只） 3.3肿瘤组织HE染色 将各组小鼠皮下移植瘤剥离后制成组织切片，采用ＨE染色方法对肿瘤组织 进行染色，以观察其组织细胞形态。（每组三只，切片做全扫描） 3.4计算抑瘤率 各组进行干预21天后脱颈椎处死小鼠，完整剥取小鼠右侧腋部肿瘤组织，滤纸吸干瘤体表面后立即采用精密电子天平称取肿瘤质量，并进行瘤体拍照。根据肿瘤质量计算各组抑瘤率，抑瘤率=(模型组平均瘤质量一药物干预组平均瘤质量)/模型组平均瘤质量×100%。（每组10只） 3.5外周血和淋巴细胞(PBMC)的测定 给药21天后，取小鼠眼窝静脉血样。用全自动血液分析仪检测白细胞(WBC)、血小板(PLT)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)及淋巴细胞(PBMC)。（每组5只） 3.6免疫器官指数 处死小鼠前先进行眼球采血，眼球采血后处死小鼠，尽量完整摘取胸腺及脾脏，冲洗并用滤纸吸干水分后称重。胸腺及脾脏指数计算公式：胸腺指数=(胸腺重量(mg)×1000)/小鼠体重(g)，脾脏指数=(脾脏重量(mg)×1000)/小鼠体重(g)。（每组10只） 3.7 免疫相关指标检测 流式细胞仪检测脾脏中CD4+、CD8+以及CD4／CD8水平；（每组3只） ELISA法检测外周血和脾脏中相肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及干扰素－γ(IFN-γ) 含量。（每组5只） 费用： 测试加工费：* 实验二 1、人参益元颗粒在小鼠体内对放化疗所致的免疫功能低下的拮抗作用 雄性SD大鼠40只，随机分为正常对照组、模型对照组及人参益元颗粒低、中、高剂量干预组共5组，每组8只，称重并标记。 （1）免疫低下模型建立：实验第1d至第7d，模型组及各治疗组采用腹腔注射20mg/mL 的CTX注射液，按40mg/kg，首次加倍，隔天1次，连续4次的造模方法，正常对照组用等体积的生理盐水代替。 （2）动物给药：第1d至第21d，药物治疗组在免疫抑制同时分别给予不同剂量人参益元药液灌服，高剂量组2.88g/kg，中剂量组1.44 g/kg ，低剂量组0.72 g/kg ，灌胃体积均为10 mL/kg ，灌胃1次/日，正常对照组和模型组大鼠每天予等量蒸馏水灌胃。 （3）检测指标。 ①流式细胞术检测外周血中CD3+、CD4+；（每组8只） ②ELISA法检测外周血相关免疫细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及干扰素-γ(IFN-γ) 含量；（每组8只） ③Western blot 检测脾组织TNF-α蛋白的表达；（每组3只） ④外周血淋巴细胞(PBMC)的测定全自动血液分析仪检测白细胞(WBC)、血小板(PLT)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)及淋巴细胞(PBMC)。（每组8只） 费用： 测试加工费：* 实验结果以报告形式提供，提供所试剂仪器等信息，数据形成表格以及PRISM软件绘制的柱状图，病理图等，可提供分析软件的文件，用以后期自由调整结题材料和论文的图信息。 | ||
| 吉林大学招标与备案(采购)管理中心 | 设 备 类：林老师: 0431-* 工 程 类：白老师: 0431-* 服务及其他货物：李老师: 0431-* |
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